■ 產(chǎn)品簡介

零背景ZT4-Blunt克隆試劑盒是專門對平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物進行高效克隆的一種陽性篩選系統(tǒng)。該克隆載體包含一個致死基因，當目的DNA片段插入克隆位點時,該致死基因被破壞，故僅帶插入目的片段的克隆才能生長形成白色菌落，無需加入IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選；克隆陽性率超過95%。

■ 產(chǎn)品亮點

·可5min快速連接，且克隆效率超過95%

·無需IPTG及X-Gal進行藍白斑篩選

·PCR擴增產(chǎn)物無需磷酸化

·酶切產(chǎn)物無需去磷酸化

·專用于平滑末端DNA片段或PCR擴增產(chǎn)物

·特別適合Pfu、KOD等系列產(chǎn)物的克隆

1.制備片段

	★平端片段（Pfu、KOD等擴增產(chǎn)物）
	★片段濃度最低可至5ng/μL

2.與載體混合加入連接酶

	★實現(xiàn)5min快連
	★最長可連接10kb片段（即使5kb片段，也已超過95%的陽性率）
	★載體穩(wěn)定性極高，反復凍融影響極低

3.轉(zhuǎn)化

	★采用先進的自殺基因篩選技術(shù)無需繁瑣藍白斑篩選，陽性克隆率接近100%

■ 菌落PCR

■ 儲存

-20℃下至少保存1年。

■ ZT4-Blunt載體測序引物序列

Forward Sequencing Primer，20-mer：5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’

Reverse Sequencing Primer，24-mer：5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’

■ ZT4-Blunt載體圖譜

■ ZT4-Blunt載體多克隆位點序列