■ 基本信息
別名: | 細(xì)菌人工染色體質(zhì)粒單拷貝 |
復(fù)制子: | OriS |
質(zhì)粒大小: | 7507bp |
原核抗性: | Chl |
克隆菌株: | EPI400 |
培養(yǎng)條件: | 30度 |
備注: | 細(xì)菌人工染色體BAC質(zhì)粒 |
■ 質(zhì)粒屬性
質(zhì)粒宿主: | 大腸桿菌 |
質(zhì)粒用途: | 人工染色體 |
片段類(lèi)型: | cDNA
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片段物種: | 空載體
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原核抗性: | Chl |
真核抗性: |
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熒光標(biāo)記: |
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■ 質(zhì)粒簡(jiǎn)介
隨著基因組學(xué)時(shí)代的到來(lái)，克隆并利用生物的重要基因，研究這些基因的結(jié)構(gòu)、功能和進(jìn)化已成為遺傳學(xué)領(lǐng)域的熱點(diǎn)之一。生物體的許多重要性狀都涉及到復(fù)雜的生理生化反應(yīng)，受多基因或基因簇的控制，與成百上萬(wàn)堿基的DNA片段相關(guān)，此外，復(fù)雜基因組的物理作圖和基因的圖位克隆也涉及到大片段的研究，因此提高載體的容納量一直是克隆載體的重要發(fā)展方向之一。
目前比較理想的細(xì)菌人工染色體（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一種以F質(zhì)粒（F-plasmid）為基礎(chǔ)建構(gòu)而成的細(xì)菌染色體克隆載體，命名為pBACs，其容量在50 - 300 kb之間，各種類(lèi)型的pBACs在大腸桿菌都呈單拷貝。
BAC是以大腸桿菌致育因子（F因子）為基礎(chǔ)的合成載體。F因子也稱(chēng)為F質(zhì)粒，是一種“性質(zhì)粒”，它可將宿主當(dāng)然體基因轉(zhuǎn)移到另一宿主細(xì)胞。F因子在大腸桿菌中的復(fù)制受到嚴(yán)格控制而保持低拷貝，一般為每個(gè)細(xì)胞1-2個(gè)拷貝，其parB基因能夠排斥細(xì)胞中的外源性F質(zhì)粒，限制了細(xì)胞內(nèi)質(zhì)粒分子間的重排，降低了重組BAC中外源DNA的重排水平和嵌合度。此外，F(xiàn)因子具有攜帶1M bp插入片段的潛能，這就使構(gòu)具有大容量克隆能力的BAC載體成為可能。
BAC載體主要包括oriS，repE(控制F質(zhì)粒復(fù)制）和parA、parB（控制拷貝數(shù)）等元件。以BAC為基礎(chǔ)克隆的載體成嵌合體的頻率較低，轉(zhuǎn)化效率高，而且以環(huán)狀結(jié)構(gòu)存在于細(xì)菌體內(nèi)，易于分離純化，已被科學(xué)界廣泛接受。目前主要用于大片段基因組文庫(kù)的構(gòu)建和大的基因簇（gene cluster）的相關(guān)研究，在各類(lèi)生物基因組計(jì)劃中發(fā)揮重要作用。
質(zhì)粒只保證關(guān)鍵序列正確，不保證表達(dá)效果。
■ 質(zhì)粒圖譜
■ 質(zhì)粒序列
質(zhì)粒序列可參考（具體以測(cè)序?yàn)闇?zhǔn)）下載：
ZK130pBeloBAC11細(xì)菌人工染色體質(zhì)粒(單拷貝).txt
